由PASEF提供动力的TIMSTOF PRO

蒂姆斯托夫职业酒店

使用 PASEF®技术的 蒂姆斯托夫职业酒店在扫描速度方面实现了革命性的提升,同时带来了增强特异性和灵敏度。

组学进入 4D时代

TIMS带来了第四个维度的分离

timsTOF_Pro-web_人像

高亮

蒂姆斯托夫

蒂姆斯托夫职业酒店推动 4D-组学研究

高速度
同步累积连续碎裂(PASEF®)技术使 毫秒/毫秒扫描速度超过 100赫兹
高通量
超快的数据采集速度显著提高了生物样本分析的通量。
深覆盖
PASEF®使灵敏度大幅增加,可以鉴定更多的多肽及其翻译后修饰(PTMs)
高耐用性
独特的仪器设计与 TIMS的正交反射,使日常实验中连续分析数千个样品,也无需清洗仪器。

功能

由PASEF提供动力的TIMSTOF PRO

蛋白质组学研究新标准,4D-蛋白质组学带来更快的速度、更深的覆盖

基于质谱的蛋白质组学已经可以同时鉴定和定量几千种蛋白,功能非常强大。然而受到当前质谱仪器扫描速度、灵敏度以及分辨率的限制,要实现蛋白质组的全覆盖还面临着巨大挑战。

蒂姆斯托夫职业酒店创新性地引入 PASEF®(并行累加串行分段同步累积连续碎裂 )技术,从而带来超快扫描速度和超高灵敏度使得仅需很少的样本,就能达到全新的蛋白质组学和磷酸化蛋白质组学鉴定深度。

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双 TIMS

捕集离子淌度谱(捕获离子迁移率光谱法,TIMS)技术首先是一种气相分离技术,它可以在高效液相色谱和质谱之外,对复杂样品体系提供额外一个维度的分离,提高了峰容量和化合物鉴定可信度。同样重要的是,TIMS还可以累积和聚焦特定质量数和淌度值的离子,使得在提供额外一维分离的同时,提高了分析的灵敏度和速度。


在 猎枪蛋白质组学分析中实现将近 100% 离子利用率(占空比)

独特的双 TIMS技术,使得在进行超高灵敏度和超快扫描速度的 猎枪蛋白质组学研究时,能达到将近 100% 离子利用率。新颖的设计使得离子在第一个淌度分析器中进行累积,与此同时在第二个淌度分析器中的离子根据淌度分批释放。这项技术被称为 PASEF®(并行累加串行分段同步累积连续碎裂 )技术。

同步累积连续碎裂(PASEF®)示意图。 蒂姆斯托夫职业酒店质谱仪的 帕塞夫策略,离子在第一个 TIMS分析器中进行累积和聚焦,同时第二个 TIMS分析器对肽段进行淌度分离和逐步释放。
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出色的硬件性能

第二代双淌度分析器专为 猎枪蛋白质组学研究设计。独特的双淌度分析器设计使得离子在第二个淌度分析器中根据淌度分批释放时,从离子源过来的后续离子会同时在第一个淌度分析器中进行累积。通过同步的平行累积技术,可以实现近乎 100% 的离子利用率。

蒂姆斯托夫职业酒店采用了一种先进的分段四极杆质量过滤器,以提高离子传输和隔离效率,四极杆切换与 TIMS分析器的离子释放同步工作,由于其超快的质量切换( < 1毫秒 ),使得 PASEF®技术达到最好的性能。

蒂姆斯托夫职业酒店构造示意图
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PASEF®

PASEF®循环时间:母离子选择与 TIMS中离子的释放同步进行,在 100毫秒离子释放时间内,平均可以选择 12个母离子进行碎裂,智能的软件可以对低丰度的母离子进行多次选择并碎裂。

为了满足 猎枪蛋白质组学对速度的追求,布鲁克质谱专家重新设计了 毫秒/毫秒技术。多肽离子通过捕集型离子淌度分析器进行分离,洗脱(~100ms)并在 QTOF中检测,生成 TIMS MS热图。在 帕塞夫方法中,离子在淌度分析器中的分离和四级杆隔离同步进行,四级杆能快速切换到下一个母离子选择。最后采集得到的母离子谱图和碎片离子谱图通过淌度值进行对齐。采用 PASEF®技术,可以实现大于 120赫兹的扫描速度,而且可以对低丰度肽段进行多次选择并二级碎裂,以提高低丰度肽段的谱图质量。


帕塞夫®技术:与 猎枪蛋白质组学研究需求完美匹配

创新性的 PASEF®技术使得离子在淌度分析器中的累积、淌度分离和四级杆隔离能同步进行。因此基于 PASEF®技术的 蒂姆斯托夫职业酒店质谱仪在大于 120赫兹的扫描速度的情况下,依然不损失灵敏度和分辨率。

优势

由PASEF提供动力的TIMSTOF PRO

卓越的耐用性,无需清洗

唯一支持 PASEF®的质谱仪
布鲁克在 2016年推出来了 TIMS(捕获离子迁移率光谱法捕集离子淌度谱 )技术,这是离子淌度技术的一次重要的革新,利用一个极紧凑的装置即可达到无与伦比的离子淌度分辨率。第二代的双离子淌度分析器现在可以实现 PASEF®(并行累积-串行分段同步累积连续碎裂 )采集策略,

此采集策略带来了高速度、高灵敏度和高分辨率的蛋白质组学研究新标准。

卓越的耐用性,无需清洁
传统质谱仪在做大队列蛋白质组学研究时,性能在短时间就会迅速下降,经常需要每两周或者一个月定期清洗一次,而 蒂姆斯托夫职业酒店出色的稳定性在 24/7 的全天候的使用过程,几个月不用做任何的清洗和维护。

timsTOF Pro-鸟枪蛋白质组学的新标准
由PASEF提供动力的TIMSTOF PRO

PaSER运行和完成--数据处理速度的一次飞跃

蒂姆斯托夫职业酒店可以在超过 120赫兹的采集速度下,以最小的上样量(<200纳克)分析数百个样本,并得到无与伦比的蛋白质组研究深度。这改变了蛋白质组学的研究方式,同时也产生了一个新的挑战 ----数据分析。现在,研究人员经常需要处理数百个蒂姆斯托夫职业酒店产生的数据,对于大多数数据处理流程而言,数据处理都会成为瓶颈。布鲁克通过引入 PaSER(实时并行数据库搜索引擎实时并行数据库搜索引擎 )的实时数据库搜索功能来改进这一步骤,从而消除了数据分析障碍。使用 帕瑟一旦 液相色谱-质谱运行完成,即刻获得实时结果。

PaSER&实时并行数据库搜索引擎
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深度挖掘 4D数据

马克斯夸特/珀尔修斯和 匹克斯工作室进行数据处理

该平台使用开放的数据格式,使得研究人员能直接使用原始数据,并使用行业领先的软件进行分析。MaxQuant支持分析四维特征数据,即包含保留时间(保留时间)离子淌度(流动性)质荷比(m/z)和离子强度(强度)信

Juergen Cox教授在美国HUPO 2019年的访谈和演讲



息,这将大大提高肽段、蛋白质及其翻译后修饰的鉴定的深度和定量的可靠性。匹克斯工作室则结合了从头测序鉴定和传统的数据库检索,软件也为更好地分析 蒂姆斯托夫数据进行了一系列优化。

应用

由PASEF提供动力的TIMSTOF PRO

重新定义蛋白质组学分析通量和灵敏度

使用 100纳克的 希拉细胞蛋白酶解液,短梯度( 30 分钟、60分钟和 90分钟 )也能得到蛋白质组为深度覆盖。
超快扫描速度和超高灵敏度带来高蛋白组覆盖

蒂姆斯托夫职业酒店结合捕集离子淌度谱(TIMS)技术和同步累积连续碎裂(帕塞夫)技术,使得不需要很大的样本量( 蛋白组学研究中一般肽段柱上样量为 1-4微克)就能达到很高的蛋白覆盖深度。
蒂姆斯托夫职业酒店仅需低于 200纳克的上样量就可以得到很好的结果,因此减少了样本制备成本以及仪器维护频率。对于 100纳克希拉酶解标品,90分钟梯度就可鉴定超过 5400个 蛋白质组在进行微量复杂体系样本分析时,也拥有着良好的定量重现性。
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最新 蒂姆斯托夫职业酒店应用报告

prm PASEF®:实现高通量、高灵敏度靶向蛋白质组学
实现高通量、高灵敏度的靶向蛋白质组学研究。prm PASEF®采集方法旨在将 PASEF®(同步累积连续碎裂 )采集策略的优点转化为靶向蛋白质组学领域。

基于 蒂姆斯托夫职业酒店的胰岛 β-细胞的蛋白组学研究
离子淌度与超高 毫秒/毫秒采集速度在 蒂姆斯托夫职业酒店上的结合,为在分子水平研究 β-细胞生理学和发现糖尿病潜在的靶向通路提供了新方案。

高通量 4D-蛋白质组学 —— 将 dia PASEF®和 埃沃赛普一号用于短梯度分析
蒂姆斯托夫职业酒店提供两种独特技术的组合,即由捕集离子淌度谱(TIMS)技术提供的第四维分离技术,用于增强离子分离和灵敏度以及 PASEF®(同步累积连续碎裂 )提高离子利用率和数据采集速度。

网络研讨会

反馈

" 我们现在知道,仅用二个维度( 保留时间和质荷比 )来分离肽段混合物时,它们仍然非常复杂。原则上来说,再增加一个维度将使得分离情况大大改善。除了增加额外的一步分离,蒂姆斯托夫还带来极快扫描速度和超高灵敏度,使我们使用更少的样本也能得到更高的蛋白鉴定深度。"

马蒂亚斯曼教授,德国马克斯-普朗克生物化学研究所蛋白质组学和信号转导部主任

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