4 d-proteomics™

随着timsTOF平台的引入,通过使用与UHR-QTOF技术耦合的TIMS,增加了额外的气相离子分离维度,实现了技术的下一个发展。这导致了从3d蛋白质组学(保留时间,m/z和MS/MS指纹)向4d蛋白质组学™(增加内在的CCS值)的转变。

4 d-mbr dia-PASEF

4 d-mbr dia-PASEF®:开启4d蛋白质组学领域

在timsTOF Pro和timsTOF fleX中增加离子迁移率尺寸带来的好处比灵敏度、选择性和MS/MS采集速度的提高更多。独特的tims设计允许重复测量所有检测离子的碰撞截面(CCS)值,这些可以进一步提高系统的选择性,从复杂样品和短梯度分析中获得更多可靠的相对定量信息。

4D-MBR:解决缺失值问题

4D-MBR:解决短梯度LFQ实验的缺失值问题

DIA是用于解决价值缺失问题的最广泛的收购策略。然而,使用它需要构建光谱库——当涉及到不常见的生物体时,这可能是及时的和困难的——而传统的DIA方法太慢,无法与短梯度分析兼容。在这种情况下,PASEF-LFQ提供了速度、灵活性和可靠性。尽管如此,即使使用> 100Hz MS/MS,在每次分析中,一些肽段可能不会被选择进行碎片化,特别是在使用短梯度时。

已经开发了运行之间的匹配(MBR)方法来解决这个缺失值的问题。MBR利用窄的m/z和保留时间窗口提取所有肽的强度信息进行量化。这种过滤器组合,以前认为不够具体,导致不准确的比率测量。4D-MBR为第一个m/z和保留时间添加了一个额外的CCS过滤器,允许更大的特异性,如我们的应用说明所示151年质

192名患者和20个QC血浆样品的定量结果,使用evossep One LC系统以11.5分钟梯度分离。(点击放大)

dia-PASEF

dia-PASEF®:将DIA分析提升到下一个层次

DIA与PASEF的结合®允许补偿传统的DIA缺陷:通过在连续的tims事件中使用m/z隔离窗口模式,在DIA - pasef中使用的离子百分比bob综合客户端app®可以大大增加(对于低复杂度的样本,可以达到100%,对于高复杂度的样本,使用相似的隔离窗口大小和m:z范围,仍然比传统的DIA方法高5倍)。的dia-PASEF®循环时间可以减少,使它兼容短梯度分离,同时保持高选择性。它得益于timspace浓度效应,允许增加灵敏度,并将DIA选择性提高到下一个水平,完全4d蛋白质组学™支持。

dia-PASEF®现在可以使用OpenSwath & MOBI-DIK或Biognosys的Spectronaut软件来处理数据。通过阅读我们的应用笔记了解更多157年质160年质