DNA-PAINT成像
探索DNA-PAINT解决方案
用于多路复用、多色DNA-PAINT成像的唯一现成解决方案
结合了布鲁克的软件控制，自动化，完全集成微流体装置这个Vutara VXL超分辨率显微镜唯一的商业系统这提供了开箱即用的多路DNA-PAINT功能。在这些工具上进行DNA-PAINT成像可以在单分子定位显微镜中实现低于10 nm的定位精度具有无限的复用潜力.
此外，带有微流控系统的Vutara显微镜还具有以下优点:
- 通过专家服务和支持轻松设置，加快数据收集速度bob电竞官方网站
- 结果比通过改装系统收集的数据更可靠和可重复
- 自动化和多条件/多用户编程，易于扩展的实验设计
了解更多有关DNA-PAINT解决方案的信息
联系我们，了解有关使用Vutara VXL显微镜执行DNA-PAINT实验的更多信息。
什么是DNA-PAINT？
什么是DNA-PAINT？
DNA-PAINT是一种通过将荧光团标记的短（<10个核苷酸）寡核苷酸与结合到靶分子（通常为抗体）的互补寡核苷酸结合来实现单分子定位的技术。它允许广泛的成像模式，从全细胞广泛的Z-堆栈到高分辨率多目标图像。
了解DNA-PAINT成像的优势
- 更高的光子产量：闪烁的持续时间通常比传统的dSTORM长。这导致荧光团产生更高的光子，因此与dSTORM和PALM等方法相比，可以获得更高的定位精度（<10 nm）。
- 几乎不可漂白的成像：样品浸泡在过量的荧光团中，允许极长时间的成像。
- 无限复用潜力：由于靶点特异性是由核苷酸序列决定的，因此有了正确的工具，就有可能用不同的寡核苷酸序列标记多个靶点。使用Vutara的集成微流体装置，可以从样本中清洗给定目标的成像链，并可以添加标记不同生物目标的不同成像链。
有关使用DNA-PAINT的超分辨率显微镜的更多信息，请参阅：
DNA-PAINT是如何工作的？
DNA-PAINT是如何工作的？
DNA-PAINT的工作原理是将含有荧光团的短“成像寡核苷酸”瞬时结合到目标上的互补寡核苷酸（称为“对接链”），如抗体、纳米体、适配子或自杀酶配体。
使用DNA-PAINT的超分辨率显微镜
DNA-PAINT超分辨率成像涉及几个步骤，包括:
- 样本通过常规技术标记为“对接链”，并准备成像。
- 对于成像，将样品浸泡在成像缓冲液（通常为PBS，但可包括氧清除剂）和与对接链互补的低浓度（通常为0.1-1 nM）成像低聚物中。成像寡核苷酸的长度通常为9-10个核苷酸，并含有荧光团。我们推荐Cy3B用于DNA-PAINT，因为它具有荧光性，因此背景较低。
- 一旦进入成像缓冲区，就可以对样本进行成像。成像链与对接链的瞬时结合阻止荧光团的扩散，使其能够在相机上成像。
由于样品浸泡在大量过量的不断交换的成像链中，因此目标基本上是不可漂白的，这使得批量处理大量帧和扩展的Z堆栈成为可能。
为什么要使用DNA-PAINT？
为什么要使用DNA-PAINT进行3D细胞超分辨率成像？
高精度定位
DNA-PAINT允许低于10纳米的定位精度，使其成为最精确的显微镜技术之一。
在这里，使用了一个水浸1.2 NA物镜的Vutara显微镜进行DNA-PAINT实验。这张图片显示了一个完整的BS-C-1细胞的微管蛋白网络，该网络用微管蛋白抗体标记，该抗体与DNA-PAINT二级抗体结合。插图显示微管蛋白网络的放大部分。微管管腔清晰可见。
多色不褪色成像
使用DNA-PAINT可以实现多路多色超分辨率成像。
DNA-PAINT具有大规模多色Z-堆叠的潜力，这是因为样品浸泡在几乎无限量的荧光团中。这使得由数百万次定位组成的大规模z叠成像成为可能。
在这里，在Vutara单分子定位显微镜上进行了双色DNA-PAINT实验。微管蛋白用青色标记，网格蛋白用品红标记。此外，由于DNA-PAINT的不可漂白性质，大Z-堆叠是可能的。
无限复用潜力
DNA-PAINT在多路成像方面具有巨大的潜力。
在这里，使用Vutara VXL和集成射流装置进行了多靶DNA-PAINT实验。在不同的探针上使用正交的对接链，可能有无限数量的目标。
图中还显示了在Vutara单分子定位显微镜和集成射流装置上进行的四靶DNA-PAINT实验。肌动蛋白洋红、tom20青色、微管蛋白黄和网格蛋白绿。
样本图像
样本图像：用于改进超分辨率成像的DNA涂料
BS-C-1标记有抗微管蛋白、肌动蛋白、抗tom20和抗网格蛋白。正交2ºDNA-PAINT抗体购自Massive-Photonics.com.
