Ressonância de Plasmão de Superfície

Ressonância de Plasmão de Superfície para análise de alto rendimento

Análise SPR de alto rendimento e alto desempenho para caracterização em tempo real, sem rótulos, das interações moleculares
Ressonância de Plasmão de Superfície

Deteção de alto rendimento e alto desempenho de interações moleculares

A ressonância de plasmão de superfície (SPR) é uma tecnologia de deteção sem rótulos, baseada em ótica, para a monitorização em tempo real das interações de união entre duas ou mais moléculas. O rendimento, a flexibilidade e a sensibilidade da plataforma SPR confere aos investigadores a capacidade de caracterizar interações biomoleculares em qualquer estudo de união. Pode ser estudada uma ampla gama de moléculas, desde iões, fragmentos e pequenas moléculas a proteínas e vírus. A tecnologia SPR oferece dados biofísicos, tais como afinidade, cinética e termodinâmica.

Os biossensores analíticos baseados em SPR são ferramentas poderosas na caracterização de interações moleculares. A combinação de três elementos — o detetor, a superfície do sensor e o sistema de fornecimento de amostras — são fundamentais para o desempenho da experiência.

Ressonância de Plasmão de Superfície

Deteção ótica em tempo real sem rótulos

As interações de união entre uma molécula na superfície do sensor (ligante) e o(s) seu(s) parceiro(s) de ligação na solução (analito) são monitorizadas em tempo real por SPR.

A SPR utiliza um tipo de reflexão interna total e causa uma redução na intensidade da luz refletida num ângulo específico do lado do vidro da superfície do sensor. À medida que as moléculas se unem, o índice de refração próximo da superfície muda, causando uma mudança no ângulo da intensidade mínima refletida. A mudança no ângulo é proporcional à massa do material ligado. A saída típica é um sensorgrama, que monitoriza a mudança no ângulo em função do tempo.

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Deteção SPR+

O Sierra SPR-24/32 Pro aplica a deteção de formação de imagens de Ressonância de Plasmão de Superfície designada SPR+. A SPR+ permite a formação de imagens de matrizes bidimensionais com um nível de sensibilidade de deteção normalmente restrito a matrizes lineares. A SPR+ deriva a sua alta sensibilidade através da combinação da formação de imagens SPR tradicional com luz laser de alta intensidade e leitura ótica de alta velocidade. A intensidade da fonte de luz permite a utilização de câmaras de alta velocidade, que por sua vez permitem mais medições de ressonância por leitura. O resultado líquido é um menor ruído RMS e uma maior precisão na medição de pequenas mudanças de resposta.

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Os sensores fáceis de utilizar reduzem a variabilidade do ensaio

Os sensores utilizados nos sistemas Sierra SPR são prismas revestidos a ouro, montados em cartuchos fáceis de manusear. O design torna a instalação simples e elimina variações de ensaio relacionadas com o utilizador. A superfície de ouro, que é necessária à SPR, pode ser revestida com uma monocamada automontada para bloquear a união não específica de proteínas e para facilitar a fixação de moléculas à superfície. A crescente variedade de superfícies químicas de ligação aumenta a utilidade dos biossensores analíticos para uma ampla gama de aplicações.

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Novos microfluidos de fluxo contínuo

O fornecimento de amostras à superfície do sensor através de um dispositivo microfluídico de fluxo contínuo produz as medições de união mais precisas. Para o fornecimento de amostras reproduzíveis, o sistema Sierra SPR-24/32 Pro utiliza tecnologia patenteada de Isolamento Hidrodinâmico (HI). O HI é um método para a apresentação de volumes de fluido pequenos, mas altamente discretos, a localizações isoladas numa superfície bidimensional contida dentro de uma célula de fluxo sob fluxo laminar. O direcionamento de fluidos específicos da localização dentro da célula de fluxo é facilitado pela combinação de componentes da focagem hidrodinâmica com evacuação específica da localização. O processo não requer a utilização de barreiras físicas dentro da célula de fluxo ou de válvulas mecânicas para controlar os trajetos do movimento do fluido, permitindo, desta forma, a multiplexagem de alto rendimento ou a construção de matrizes bidimensionais com pontos de deteção individualmente endereçáveis.

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Aplicações da Ressonância de Plasmão de Superfície

O Sierra SPR Pro-Series é um biossensor analítico de elevado desempenho e alto rendimento para a caracterização em tempo real, sem rótulos, de interações moleculares através de uma ampla gama de aplicações.

Investigação da união dependente da condição através da utilização de Frame Inject

一个investigacao tradicional da união dependente da condição exige elevados custos de reagentes, assim como um longo tempo de produção. A Frame Inject permite poupar custos e tempo a um baixo consumo de amostras.



Como influenciar a densidade do ligante através da utilização do acoplamento de aminas
É fundamental encontrar o nível ideal de imobilização para obter medições cinéticas ideais. Aqui, examinamos os parâmetros influenciadores em diferentes alvos de exemplo.



Triagem e caracterização da união de pequenas moléculas a alvos proteicos
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Triagem e caracterização da bioterapêutica
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