什么是清除样本成像?

Clearing-Sample / Cleared-Tissue成像

组织清理技术已成为一种有价值的工具,应用于组织的三维微观结构分析(如神经科学、发育生物学、连接体学)。

生物组织的主要成分,即水、脂类和蛋白质的折射率(RI)不同,导致光在通过组织时发生散射。组织清除改变了通常不透明样品的光学特性,使其透明,同时保持其结构和荧光标记完整。在清除后,光可以在样品中不受吸收和散射限制地传播许多毫米,非常适合在样品深处进行高分辨率显微成像。

Light-Sheet Microscopy利用了清除样品的光学优势,能够快速、长期、类似共焦的光学切片和清除样品的高质量3D成像。

光学清除方法

组织清除方法通过去除、改变或替换一些成分来均匀化样本的RI。

清理方法可分为两类:

  • 以溶剂为基础的清算方法(如uDISCO, 3DISCO, BABB)
  • Aqueous-based结算方法
    -简单浸泡(如:SeeDB, FAST-Clear)
    -水合过度(如CUBIC, ScaleS)
    -水凝胶包埋(如CLARITY, PACT/PARS)

没有一种单一的清除方法对所有的组织类型、组织大小和/或实验都有效。

溶剂型的结算方法
优点:清洗质量高,清洗速度快,样品保存时间长
缺点:有毒和/或腐蚀性,不适合脂质染色

Aqueous-based结算方法
优点:保存荧光蛋白发射,保存脂质,保存组织结构
缺点:清理速度慢,不适合大样品