SPR

대량 분석을 위한 SPR

분자 간 상호작용의 레이블이 없는 실시간 특성화를 위한 고성능 대량 SPR 분석
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고성능 대량 분자 간 상호작용 탐지

표면 플라스몬 공명(SPR)은 광학 기반의 레이블이 없는 탐지 기술로, 두 개 이상 분자의 결합 상호작용을 실시간 모니터링할 수 있습니다. SPR 플랫폼의 높은 처리량과 유연성, 감도는 연구자들이 모든 결합 연구에서 생체분자의 상호작용을 특성화할 수 있는 가능성을 열어줍니다. 이온, 파편, 작은 분자에서부터 단백질과 바이러스에 이르기까지 분자 연구를 폭넓게 수행할 수 있습니다. SPR 기술은 친화성, 동역학, 열역학과 같은 생물물리학 데이터를 제공합니다.

SPR 기반의 분석 생체센서는 분자 간 상호작용을 특성화할 수 있는 강력한 도구입니다. 실험 수행에 빠질 수 없는 탐지기, 센서 표면, 샘플 전달 시스템의 세 가지 구성요소가 조합됩니다.

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레이블이 없는 실시간 광학 탐지

SPR은 센서 표면 분자 간의 결합 상호작용(리간드) 및 해당 분자의 용액 내 결합 상대(분석물질)를 실시간으로 모니터합니다.

SPR은 내부 전반사 유형을 사용하여 센서 표면 유리에서 특정 각도로 반사되는 빛의 강도를 줄입니다. 분자가 결합하면 표면에 가까운 굴절률이 변화하여 최소 반사 강도의 각도가 바뀝니다. 각도의 변화는 결합된 물질의 질량에 비례합니다. 대표적인 결과 출력 방식은 센소그램으로, 시간 함수에 따른 각도 변화를 모니터링합니다.

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SPR+ 탐지

Sierra SPR-24/32 Pro에는 SPR+라고 하는 표면 플라스몬 공명 이미징 탐지 기능이 탑재되어 있습니다. SPR+는 일반적으로 선형 배열로 제한된 탐지 감도 수준으로 2차원 배열 이미징을 가능하게 합니다. SPR+는 전통적인 SPR 이미징을 고강도 레이저빔 및 고속 광학 스캐닝과 결합하여 높은 감도를 실현합니다. 광원의 강도로 인해 고속 카메라를 사용할 수 있어 스캔당 더욱 많은 공명을 측정할 수 있습니다. 이러한 결과로 RMS 노이즈가 낮아지며 작은 반응 변화를 측정할 때도 정확성이 향상됩니다.

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사용자 친화적인 센서로 시험 변동성 감소

Sierra SPR 시스템에 사용된 금박 프리즘 센서는 취급하기 쉬운 카트리지에 장착되어 있습니다. 이러한 설계로 인해 설치가 직관적이며 사용자로 인해 발생하는 시험 변동성의 여지를 해소합니다. SPR의 필수 요소인 금박 표면은 단백질의 비특이 결합을 차단하고 분자를 표면에 결착시키기 위해 자가조립단분자층으로 코팅할 수 있습니다. 표면 결합 화학의 다양성이 증가하면서 광범위한 적용 분야에서 분석 생체센서가 더욱 폭넓게 사용되고 있습니다.

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새로운 연속흐름 미세유체공학

연속흐름 미세유체공학 장치를 통해 센서 표면으로 샘플을 전달하면 가장 정확한 결합 측정 결과를 얻을 수 있습니다. Sierra SPR-24/32 Pro 시스템은 샘플 전달의 반복 재현을 위해 특허받은 유체역학 격리(HI) 기술을 사용합니다. HI는 양은 적지만 분리도가 높은 유체를 층류 하의 흐름 셀 내에 포함된 2차원 표면상의 격리된 위치에 제공하는 기법입니다. 흐름 셀 내 위치 특정 유체의 어드레싱은 유체역학적 포커싱 컴포넌트와 사이트 특정 배출을 결합하여 수행됩니다. 이 과정에서 유체가 움직이는 경로를 제어하기 위해 흐름 셀 내에 물리적인 분리막 또는 기계적 밸브를 사용할 필요가 없으므로 대량의 멀티플렉싱 또는 개별 어드레서블 탐지 지점이 있는 2차원 배열 구조 구성이 가능해집니다.

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표면 플라스몬 공명의 응용 분야

Sierra SPR Pro 시리즈는 폭넓은 응용 분야에서 분자 간 상호작용의 레이블이 없는 실시간 특성화를 위한 고성능 대량 분석 생체센서입니다.

프레임 주입을 사용하여 조건에 구애받지 않는 결합 조사
조건에 구애받지 않는 결합을 조사하는 데에는 전통적으로 높은 시약 비용과 긴 실행 시간이 필요했습니다. 프레임 주입은 샘플 소비량을 줄이면서 비용과 시간을 절약해줍니다.

아민 결합을 사용하여 리간드 밀도에 영향을 주는 방법
이상적인 부동 수준을 찾는 것은 최적의 동역학 측정 결과를 얻는 데 매우 중요합니다. 서로 다른 예제 표적에서 영향을 주는 파라미터를 조사하는 방법을 소개해드립니다.

단백질 표적에 결합된 작은 분자 스크리닝 및 특성화
SPR 탐지를 통한 라벨이 없는 실시간(RT-LF) 분석은 분자량이 작은 약물 및 신약 후보물질의 생물물리학적 특성을 정의할 수 있는 강력한 도구입니다.

생체요법의 스크리닝 및 특성화
SPR 탐지를 통한 라벨이 없는 실시간(RT-LF) 분석은 단백질 요법의 생물물리학적 특성을 정의할 수 있는 강력한 도구입니다.


Tackling Challenging Targets with High-Throughput Biophysical Screening at Novartis
Learn in this note how multiplexing, automation and automated data analysis with Genedata Screener take SPR to the next level in this real-life example.

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