超分辨率显微镜

活细胞成像

粒子跟踪与细胞成像结合

使用Vutara的活细胞单分子定位显微镜

生物成像需要在细胞内查看动态结构。可视化细胞中的单个生物分子(粒子跟踪)或观察生物学过程,例如膜,细胞器或细胞骨架运动。

Vutara VXL显微镜的功能非常适合活细胞单分子定位显微镜:

  • 使用专利双翼技术的3D定位 - 每个图像都有1 µm的3D数据 - 无需Z系列
  • 轴向范围可以通过Z系列扩展
  • 快速获取 - 最多800 fps全帧,最多3000 fps,较小的ROI
  • 敏感探测器 - 冷却的科学CMOS摄像头
标记EGF受体的量子点的单个粒子流线。
Alexa Fluor647®标记转移的实时成像。顶部,沿细胞膜移动的转铁蛋白簇的电影。底部,按时间颜色颜色的求和图像。

粒子跟踪

Vutara VXL显微镜设计用于单分子定位显微镜,因此是理想的粒子跟踪实验设计的。Vutara在高速和三维中对单个荧光团成像的内在能力使其非常适合粒子跟踪。可以用有机染料,蛋白质或量子点标记样品,并使用Vutara VXL的高速和敏感相机成像。Vutara的SRX软件具有用于在多个帧上跟踪荧光团的内置粒子跟踪算法。这是基于图像的超分辨率显微镜(例如STED或SIM)的单分子定位显微镜的强大而独特的特征。SRX软件还包括一个综合粒子跟踪统计软件包,用于分析您的数据。

在左侧,我们可以看到用量子点标记的单个EGF受体的扩散。

细胞成像

Vutara VXL显微镜设计用于单分子定位显微镜,能够在有意义的时间尺度上捕获生物运动。这种独特的成像方式使用户能够收集感兴趣结构的动态超分辨率图像,同时还为用户提供了随着时间的推移的精确3D位置。这突出了单分子定位显微镜的独特成像方式,并将其与基于成像的超分辨率技术区分开来。

在右边,我们看到两个实验监测活细胞中的线粒体动力学。一种用橙色Halotag®染料(549)成像,另一个用可光活化的远红色染料(PA-JF-646®)标记。

组合粒子跟踪和细胞成像

Vutara VXL显微镜执行多色单分子成像的能力可以实现一些独特的实验设计。左侧显示了表达Tomm-20 ::Halotag®的细胞中的两个颜色实验。在此实验中,Tomm20 ::Halotag®标记了浓度的JF549®和非常稀疏的PA-JF646®浓度。这使密集的染料可以用作上下文标记,从而可以随着时间的推移重建和定位。第二染料允许在线粒体的背景下跟踪单分子的扩散。使用这种技术,可以监测蛋白质在膜中的扩散如何随着线粒体流量和融合或裂变而变化。

活成像的线粒体的覆盖层和线粒体中单个Tomm20蛋白扩散的单个粒子跟踪的流线。
单个TOMM20蛋白的三个单独粒子轨道。
Tomm20扩散的叠加和线粒体的结构图像。